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T7 DNA聚合酶

更新時(shí)間:2022-05-03

簡(jiǎn)要描述:

T7 DNA聚合酶由晶抗生物提供,包括T7 DNA聚合酶說(shuō)明書(shū),以及T7 DNA聚合酶級(jí)別,用途等詳細(xì)介紹。

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T7 DNA聚合酶


英文名稱 : T7 DNA Polymerase


分子量 : 由2個(gè)亞基組成,804kDa多肽(T7噬菌體基因5表達(dá)產(chǎn)物)和12kDa硫氧還蛋白(大腸桿菌trxA基因表達(dá)產(chǎn)物)


級(jí) 別 : BR


來(lái) 源 : 兩個(gè)大腸桿菌菌株,一個(gè)菌株含有T7噬菌體克隆基因5,另一個(gè)菌株含有大腸桿菌克隆基因trxA


保 存 : -20°C


濃 度 : 10u/ul


活力定義 : 在37°C條件下,30分鐘內(nèi)能使10 nmol 的脫氧核糖核苷酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量


活性分析混合物 : 40mM Tris-HCL(PH7.5), 1mM DTT, 10mM MgCL2, 0.1mg/ml BSA, 0.033mM各種dNTP,0.4MBq/ML(3H)-dTTP和0.5mM堿性變性的牛胸腺DNA


保存緩沖液組分 : 20mM 磷酸鉀(PH7.4), 0.1mM EDTA, 1mM DTT和50%(v/v)甘油


10×反應(yīng)緩沖液 : 400mM Tris-HCL(PH7.5,25℃), 100mM MgCL2, 10mM DTT


抑制劑 : 金屬螯合劑,修飾試劑(無(wú)水醋酸和N-乙基順丁烯二酰亞胺可使3'→5' 外切核酸酶失活,但不影響聚合酶活性


失 活 : 75℃加熱10分鐘


質(zhì)量控制 : 測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切脫氧核糖核酸酶污染


使用注意 : 37℃分析時(shí)需要短時(shí)間孵育


性 狀 : 懸浮液,重組酶。T7 DNA聚合酶是一種模板依賴型DNA聚合酶,催化5'→3'方向的DNA合成。該DNA聚合酶具有高持續(xù)合成能力,可持續(xù)合成長(zhǎng)片段DNA。該酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA具有3'→5'外切核酸酶活性


用 途 : 生化研究。除去殘留的基因組DNA,純化共價(jià)閉環(huán)的DNA分子;長(zhǎng)片段引物延伸反應(yīng);DNA 3'-末端標(biāo)記;定點(diǎn)突變位點(diǎn)的鏈延伸反應(yīng);DNA 5'-突出點(diǎn)位補(bǔ)平;第二鏈cDNA合成;原位檢測(cè)凋亡相關(guān)DNApian


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